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柱色譜分離提純是根據二茂鐵和乙酰二茂鐵對硅膠吸附能力的差異而進行分離提純。柱層析是在層析柱中裝入作為固定相的吸附劑,把試樣流經固定相而被吸附,然后利用薄層層析中探索到的能分離組分的溶劑流經層析柱,試樣中的各組在固定相和溶劑間重新分配,分配比大的組分先流出,分配比小的組分后流出,對于不易流出的組分可另選擇合適的溶劑再進行洗脫,這樣就可以達到各組分的分離提純。 柱色譜(柱上層析)常用的有吸附色譜和分配色譜兩類。吸附色譜常用氧化鋁和硅膠作固定相;而分配色譜中以硅膠、硅藻土和纖維素作為支持劑,以吸收較大量的液體作固定相,而支持劑本身不起分離作用。 吸附柱色譜通常在玻璃管中填入表面積很大經過活化的多孔性或粉狀固體吸附劑。當待分離的混合物溶液流過吸附柱時,各種成分同時被吸附在柱的上端。當洗脫劑流下時,由于不同化合物吸附能力不同,往下洗脫的速度也不同,于是形成了不同層次,即溶質在柱中自上而下按對吸附劑的親和力大小分別形成若干色帶,再用溶劑洗脫時,已經分開的溶質可以從柱上分別洗出收集;或將柱吸干,擠出后按色帶分割開,再用溶劑將各色帶中的溶質萃取出來。
柱色譜分離提純是根據二茂鐵和乙酰二茂鐵對硅膠吸附能力的差異而進行分離提純。化合物的吸附性與它們的極性成正比,化合物極性越強,其吸附性越強。由于二茂鐵的極性弱于乙酰二茂鐵,二茂鐵首先向下移動,被洗脫下來。加強洗脫劑的極性,乙酰二茂鐵也被洗脫下來,從而將乙酰二茂鐵和二茂鐵分離開。